Raskaustesti selvittää, onko naisen virtsassa istukkagonadotropiinia eli HCG-hormonia (human chorionic gonadotropin), jota hedelmöittynyt munasolu alkaa tuottaa pian sen jälkeen, kun se on jakautunut ensimmäisiä kertoja ja kiinnittynyt kohtuun.
Raskaustestilaite tunnistaa hormonin niin kutsuttujen monoklanaalisten vasta-aineiden avulla. Ne tunnistavat hormonin, ja kukin niistä kiinnittyy sen tiettyyn osaan. Yksi vasta-aine on kiinnittynyt väriaineeseen, joka sijaitsee testipuikon siinä päässä, joka kastetaan virtsaan.
Jos virtsassa on HCG-hormonia, se kiinnittyy värjättyyn vasta-aineeseen. Oli virtsassa hormonia tai ei, vasta-aine kulkeutuu virtsan mukana kapillaari-ilmiön vaikutuksesta puikossa eteenpäin ja törmää testiviivaan, joka sisältää HCG-hormonin toiseen osaan sitoutuvaa toista vasta-ainetta.
Jos näyte on positiivinen, HCG-hormoni on jo kiinnittynyt värimerkittyyn vasta-aineeseen ja testiviiva muuttuu värilliseksi. Jos nainen ei ole raskaana, värillinen vasta-aine jatkaa matkaansa testiviivan ohi. Testin toimivuus varmistetaan kontrolliviivalla. Siinä on kolmatta vasta-ainetta, jota sitoutuu värilliseen vasta-aineeseen hormonista riippumatta. Kontrolliviiva ilmaisee, että virtsa on päässyt testin loppupäähän ja testi toimii.